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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  試劑盒  >  檢測試劑盒  >  TO1013丙二醛(MDA)檢測試劑盒100T

丙二醛(MDA)檢測試劑盒100T

簡要描述:丙二醛(MDA)檢測試劑盒100T,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:TO1013
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:233

詳細(xì)介紹

動物或植物細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激(oxidative stress)時,會發(fā)生脂質(zhì)氧化,丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一種生物體脂質(zhì)氧化

的天然產(chǎn)物,一些脂肪酸氧化后逐漸分解為一系列包括MDA在內(nèi)的復(fù)雜化合物,此時通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化

的水平,因此MDA的測定被廣泛用作脂質(zhì)氧化的指標(biāo),生物體內(nèi)的一些其它生化反應(yīng)也會產(chǎn)生MDA,

例如thromboxane synthase也可以催化產(chǎn)生,但只要在測定時設(shè)置適當(dāng)對照即可觀察到脂質(zhì)氧化水平的變化。


丙二醛(MDA)檢測試劑盒100T,MDA Assay Kit)又稱脂質(zhì)氧化(MDA)檢測試劑盒,是采用一種基于MDA和硫

代酸(thiobarbituric acid, TBA)反應(yīng)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物的顯色反應(yīng),隨后通過比色法用于對血漿、血清、尿液、動植物組織或

細(xì)胞裂解液中MDA進(jìn)行定量檢測,廣泛用于脂質(zhì)氧化(lipid peroxidation)水平檢測,丙二醛在較高溫度及酸性環(huán)境中可與TBA

發(fā)生反應(yīng)形成紅色的MDA-TBA加合物,MDA-TBA加合物在535nm處有最大吸,據(jù)此可以通過比色法進(jìn)行檢測。

另外MDA-TBA加合物也可以在535nm被激發(fā)產(chǎn)生最大發(fā)射波長553nm,此也可以進(jìn)行熒光檢測。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,

不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機(jī)、恒溫箱或水浴鍋、酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板


操作步驟(僅供參考):

1、準(zhǔn)備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。

③細(xì)胞或組織樣品∶取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設(shè)置對照孔、測定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并

注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調(diào)零),酶標(biāo)儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準(zhǔn)確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(yīng)(備選方案),以對照孔為對照調(diào)零,酶標(biāo)儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應(yīng)為非必須步驟,可37℃準(zhǔn)確孵育1h后直接以對照孔為對照調(diào)零,酶標(biāo)儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項(xiàng)∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復(fù)凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液,應(yīng)盡快檢測,亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應(yīng)注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標(biāo)不宜過多,否則操作時間不一,有可能導(dǎo)致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。




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