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鼠疫桿菌雙色熒光PCR檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)要描述:鼠疫桿菌雙色熒光PCR檢測(cè)試劑盒,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞,重組蛋白,ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、動(dòng)物血清和培養(yǎng)試劑等

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-12-30
  • 訪  問(wèn)  量:190

詳細(xì)介紹

本產(chǎn)品僅供科研,不得做其它用途

更多產(chǎn)品詳細(xì)信息可免費(fèi)向客服索取訂購(gòu)

本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品DNA模板。

2. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

4. PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn),不能用于定量。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研

鼠疫桿菌雙色熒光PCR檢測(cè)試劑盒

鼠疫桿菌雙色熒光PCR檢測(cè)試劑盒樣品的制備 

試劑盒組成

序號(hào)

組成

50T/盒

1

RT-PCR反應(yīng)液

875 μL×1管

2

  混合酶液

125 μL×1管

3

  陽(yáng)性對(duì)照

40 μL×1管

4

  C 陰性對(duì)照

40 μL×1管

5

說(shuō)明書(shū)

1份








【儲(chǔ)存條件及有效期】避光-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,有效期12個(gè)月。

【適用儀器】 ABI7500、羅氏 96/480、安捷倫、伯樂(lè)、國(guó)產(chǎn)博日、宏石等各種熒光定量 PCR 儀。

【樣本要求】

1.血液或血清樣品:使用無(wú)菌注射液抽取樣品置于離心管中待檢。

2.肌肉或內(nèi)臟樣品:取少量樣品(23克)于研缽或勻漿器中研磨,然后將研磨勻漿轉(zhuǎn)入無(wú)菌離心管中,3000rpm/min 離心10分鐘取上清待檢。

3.應(yīng)避免標(biāo)本間交叉污染。

4.標(biāo)本收集后可立即檢測(cè);若不能立即檢測(cè),可置于2~8℃冷藏過(guò)夜保存;如需長(zhǎng)期保存,標(biāo)本應(yīng)凍存于-80以下,避免反復(fù)凍融

使用方法:

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。

由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2,1。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同。

3. 在 6 號(hào)管中加入 5μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 4 號(hào)管中加入 5μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E4 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

檢驗(yàn)方法的局限性】

1.當(dāng)檢測(cè)樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒檢出可能會(huì)發(fā)生假陰性的結(jié)果。

2.被檢樣本在采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存以及處理過(guò)程中操作方式不當(dāng)容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

3.樣本在采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存以及處理過(guò)程中發(fā)生交叉污染,則容易得到假陽(yáng)性結(jié)果。

【注意事項(xiàng)】

1.使用本試劑盒的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)嚴(yán)格按照國(guó)家有關(guān)部分頒布的有關(guān)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范進(jìn)行管理;

2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理;

3.各區(qū)域物品均為專(zhuān)用,不得交叉使用,以免污染;檢測(cè)結(jié)束后,應(yīng)立即對(duì)工作臺(tái)清潔;

4.吸取反應(yīng)液時(shí),應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡;上 PCR 儀前,應(yīng)注意檢查各反應(yīng)管是否蓋緊,以免液體蒸發(fā)造成結(jié)果不準(zhǔn)確;

5.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心;

6.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放;

7.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記;

8.檢測(cè)過(guò)程中使用過(guò)的吸頭,應(yīng)直接打到盛有 10%次氯酸的廢物缸內(nèi),檢測(cè)結(jié)束的PCR 反應(yīng)管,切忌開(kāi)蓋,并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄;工作臺(tái)及各種實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)定期用 10%次氯酸、75%酒精或紫外燈進(jìn)行消毒;

9.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用;并在有效期內(nèi)使用。

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