細胞名稱：小鼠原成骨細胞MC3T3-E1 Subclone 14ATCC

細胞代次：P4

細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：

取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。

2、細胞傳代：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，zui后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）待細胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；

4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

4、細胞復蘇：

1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；

2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；

3）棄上清，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

原代細胞與細胞系有什么區(qū)別？細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的*性。細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上，連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。

1、倍增和代數有什么區(qū)別？倍增是培養(yǎng)物中細胞總數加倍，通常是指細胞指數或對數生長期。代數是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數，傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。

2、接收到的凍存細胞該如何處理？收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。

3、有多少經驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)？推薦有經驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室，我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。

售后服務告知書

1）細胞出現問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？

1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；

2. 細胞污染問題，請在收到產品48小時內，給我們提出真實的實驗結果，核實后重發(fā)；

3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后，絕大多數細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；

4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現污染，重發(fā)；

5. 細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發(fā)；

6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的，并跟技術人員溝通的，由技術人員判定為我方責任的，重發(fā)。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。

二）細胞出現問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？

1. 客戶造成細胞污染，不重發(fā)；

2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

4. 細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理的，不重發(fā)；

6. 細胞收到2天內，未告知，不重發(fā)；

7. 視具體情況而定。

YS4722C人卵巢癌貼壁細胞OV-90

YS4723C人神經星形膠質母細胞瘤U-138 MG

YS4724C人急性骨髓白血病細胞KG-1a

YS4725C人惡性黑色素瘤細胞SK-MEL-2

YS4726C人乳頭狀甲狀腺癌細胞SNU-790

YS4727C人乳頭狀甲狀腺癌細胞IHH4

YS4728C小鼠急性骨髓性白血病C1498

YS4729C人巨核細胞白血病細胞株M-07e

YS4730C小鼠神經干細胞C17.2

YS4731C人T淋巴細胞 ADCC Reporter Cells - Human T LymphocytesJurkat-Lucia NFAT hCD32

YS4732C人T淋巴細胞 ADCC Reporter Cells - Human T LymphocytesJurkat-Lucia NFAT hCD16

YS4733C"人腎皮質近曲小管上皮細胞

HK-2"

YS4734C人舌鱗癌細胞UPCI:SCC154

YS4735C人舌鱗癌細胞UPCI:SCC152

YS4736C"人正常肥大細胞

LUVA (Human Mast CellLine)"

YS4737C小鼠B淋巴細胞白血病SH2

YS4738C人舌頭鱗癌細胞UPCISCC172

YS4739C人宮頸癌細胞H1 Hela

YS4740C人卵巢癌細胞TOV21G

YS4741C人甲狀腺癌細胞HTh7

YS4742C人甲狀腺癌細胞(未分化)KHM-5M

YS4743C乳腺腺癌細胞CAMA1

YS4744C人肺退行性癌細胞Calu-6

YS4745C人卵巢癌細胞TOV112D

YS4746C胎盤絨毛癌細胞JAR

YS4747C人膀胱癌細胞TCCSUP

YS4748C胰腺癌細胞PSN1

YS4749C人胰腺導管癌細胞SU.86.86

YS4750C人食道癌腫瘤細胞SK-GT-4

YS4751C豬正常的腸上皮細胞IPEC-J2

YS4752C非小細胞肺癌腺癌細胞NCI-H2085

YS4753C人胃癌細胞NUGC-3

YS4754C人低分化肺腺癌細胞SK-LU-1

YS4755C人結腸癌肝轉移細胞系KM12SM

YS4756CRectal adenocarcinomaSNU-61

YS4757C人腦多形性膠質母細胞瘤細胞BT-325

YS4758C大鼠肝癌細胞H4-II-E-C3

YS4759C 人肺癌腺癌細胞HCC2935

YS4760CB淋巴母細胞瘤細胞pfeiffer

YS4761C小細胞肺癌細胞SW1271

YS4762C小鼠顱頂前骨細胞亞克隆4MC3T3-E1 Subclone 4

YS4763C小鼠原成骨細胞MC3T3-E1 Subclone 14

YS4764C人神經內分泌前列腺癌細胞NCI-H660

YS4765C人外周血嗜堿性白血病細胞KU812

YS4766C小鼠黑色素瘤細胞B16-F1

YS4767C人肺乳頭狀腺癌細胞NCI-H820

YS4768C人前列腺癌細胞22Rv1

YS4769C人口腔牙齦鱗狀細胞癌YD-38

YS4770C人肺癌腺癌貼壁細胞HCC1171

YS4771C急性淋巴細胞白血病細胞I 2.1

YS4772C非小細胞肺癌細胞NCI-H1915

YS4773C乳腺癌細胞HCC1143

YS4774C人腎細胞癌CAL-54

YS4775C人皮膚鱗癌細胞系HSC-5

YS4776C人膠質母細胞瘤細胞SNU-201

YS4777C神經母細胞瘤細胞NB1

YS4778C腦神經母細胞瘤KP-N-YN

YS4779C人食管癌細胞EC109 (別名：Eca-109)

YS4780C直腸腺癌細胞RCM-1

YS4781C脾淋巴瘤細胞SLVL

YS4782C舌頭鱗狀腫瘤細胞SAS

YS4783C胃癌細胞SNU-520

YS4784C小鼠淋巴瘤細胞(NK靶細胞YAC-1

YS4785C人肺腺癌細胞NCI-H2228

YS4786C人脊索瘤細胞U-CH1

YS4787C成人急性髓性白血病細胞KASUMI-6

YS4788C人甲狀腺癌細胞(未分化）KMH-2

YS4789C小鼠腎上腺皮質瘤細胞Y1

YS4790C人黑素瘤細胞WM-266-4

YS4791C中國倉鼠卵巢細胞CHO/DHFR

YS4792C惡性黑色素瘤細胞C32

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